遺傳毒性

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項(xiàng)目詳情

　　遺傳毒性試驗(yàn)主要包括四類：Ames實(shí)驗(yàn)（鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)）、哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外基因突變?cè)囼?yàn)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外染色體畸變?cè)囼?yàn)和小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)。

　　一，Ames實(shí)驗(yàn)（鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)）

　　鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，在含微量組氨酸的培養(yǎng)基中，除極少數(shù)自發(fā)回復(fù)突變的細(xì)胞外，一般只能分裂幾次，形成在顯微鏡下才能見到的微菌落。受誘變劑作用后，大量細(xì)胞發(fā)生回復(fù)突變，自行合成組氨酸，發(fā)育成肉眼可見的菌落。某些化學(xué)物質(zhì)需經(jīng)代謝活化才有致變作用，在測(cè)試系統(tǒng)中加入哺乳動(dòng)物微粒體酶，可彌補(bǔ)體外試驗(yàn)缺乏代謝活化系統(tǒng)之不足。

　　二，哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外基因突變?cè)囼?yàn)

　　TK基因的產(chǎn)物胸苷激酶在體內(nèi)催化從脫氧胸苷（TdR）生成胸苷酸（TMP）的反應(yīng)。在正常情況下，此反應(yīng)并非生命所必需，原因是體內(nèi)的TMP主要來自于脫氧尿嘧啶核苷酸（dUMP），即由胸苷酸合成酶催化的dUMP甲基化反應(yīng)生成TMP。但如在細(xì)胞培養(yǎng)物中加入胸苷類似物（如三氟胸苷，即TFT——trifluorothymidine），則TFT在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸，進(jìn)而摻入DNA，造成致死性突變，故細(xì)胞不能存活。若TK基因發(fā)生突變，導(dǎo)致胸苷激酶缺陷，則TFT不能磷酸化，亦不能摻入DNA，故細(xì)胞在含有TFT的培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng)，即表現(xiàn)出對(duì)TFT的抗性。根據(jù)突變集落形成數(shù)，計(jì)算突變頻率，以判定受試物的致突變性。

　　三，哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外染色體畸變?cè)囼?yàn)

　　染色體畸變分為染色體結(jié)構(gòu)畸變和數(shù)目畸變，染色體結(jié)構(gòu)畸變又分為缺失、短片、互換等。

　　在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下，使培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞暴露于受試物中，用中期分裂相阻斷劑（如秋水仙素或秋水仙堿）處理，使細(xì)胞停止在中期分裂相，隨后收獲細(xì)胞，制片，染色，分析染色體畸變。

　　四，小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)

　　微核是在細(xì)胞的有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時(shí)，仍然留在細(xì)胞質(zhì)中的染色單體或染色體的無著絲粒片段或環(huán)。它在末期以后，單獨(dú)形成一個(gè)或幾個(gè)規(guī)則的次核，被包含在細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)而形成，由于比核小得多，故稱微核。

　　遺傳毒性常見標(biāo)準(zhǔn)

　　ISO 10993-3、GB/T 16886.3、OCED471、OECD473、OECD474、OECD476。

　　主要測(cè)試產(chǎn)品

　　醫(yī)療器械，藥物，農(nóng)藥，化妝品，衛(wèi)生用品等。

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